رویه های استانداردسازی اتاق استریل و مشخصات پذیرش

1. هدف: هدف این روش ارائه یک روش استاندارد برای عملیات آسپتیک و حفاظت از اتاق های استریل است.

2. دامنه کاربرد: آزمایشگاه تست بیولوژیکی

3. شخص مسئول: تست کننده نظارت QC

4. تعریف: هیچ

5. اقدامات احتیاطی ایمنی

برای جلوگیری از آلودگی میکروبی، به شدت عملیات آسپتیک را انجام دهید. اپراتورها باید لامپ UV را قبل از ورود به اتاق استریل خاموش کنند.

6. رویه ها

6.1. اتاق استریل باید مجهز به اتاق عمل استریل و اتاق بافر باشد. تمیزی اتاق عمل استریل باید به کلاس 10000 برسد. دمای داخل باید در 20-24 درجه سانتیگراد و رطوبت باید در 45-60٪ حفظ شود. تمیزی نیمکت تمیز باید به کلاس 100 برسد.

6.2. اتاق استریل باید تمیز نگه داشته شود و انباشتن زباله برای جلوگیری از آلودگی اکیداً ممنوع است.

6.3. از آلودگی کلیه تجهیزات استریلیزاسیون و محیط های کشت به شدت جلوگیری کنید. کسانی که آلوده هستند باید استفاده از آنها را متوقف کنند.

6.4. اتاق استریل باید مجهز به مواد ضد عفونی کننده با غلظت کار باشد، مانند محلول 5٪ کرزول، 70٪ الکل، محلول کلرمتیونین 0.1٪ و غیره.

6.5. اتاق استریل باید به طور مرتب استریل شود و با ضدعفونی کننده مناسب تمیز شود تا اطمینان حاصل شود که تمیزی اتاق استریل مطابق با الزامات است.

6.6. تمام وسایل، ابزار، ظروف و سایر مواردی که باید به اتاق استریل آورده شوند باید محکم بسته بندی شده و با روش های مناسب استریل شوند.

6.7. قبل از ورود به اتاق استریل، کارکنان باید قبل از ورود به اتاق استریل، دست‌های خود را با صابون یا مواد ضدعفونی‌کننده بشویید و سپس لباس‌های مخصوص کار، کفش، کلاه، ماسک و دستکش را در اتاق بافر عوض کنند (یا دوباره دست‌های خود را با اتانول 70 درصد پاک کنند). انجام عملیات در اتاقک باکتریایی

6.8. قبل از استفاده از اتاق استریل، لامپ ماوراء بنفش در اتاق استریل باید برای تابش و استریل شدن بیش از 30 دقیقه روشن شود و نیمکت تمیز باید برای دمیدن هوا در همان زمان روشن شود. پس از اتمام عمل، اتاق استریل باید به موقع تمیز شود و سپس با اشعه ماوراء بنفش به مدت 20 دقیقه استریل شود.

6.9. قبل از بازرسی، بسته بندی بیرونی نمونه آزمایشی باید دست نخورده نگه داشته شود و برای جلوگیری از آلودگی نباید باز شود. قبل از بازرسی، از گلوله های پنبه 70 درصد الکل برای ضدعفونی سطح بیرونی استفاده کنید.

6.10. در طول هر عمل، یک کنترل منفی باید انجام شود تا قابلیت اطمینان عملیات آسپتیک بررسی شود.

6.11. هنگام جذب مایع باکتری، باید از یک توپ مکنده برای جذب آن استفاده کنید. نی را مستقیماً با دهان خود لمس نکنید.

6.12. سوزن تلقیح باید قبل و بعد از هر بار استفاده با شعله استریل شود. پس از سرد شدن، می توان کشت را تلقیح کرد.

6.13. نی ها، لوله های آزمایش، ظروف پتری و سایر ظروف حاوی مایع باکتریایی باید برای ضدعفونی در یک سطل استریلیزاسیون حاوی محلول 5 درصد لیزول خیس شوند و پس از 24 ساعت خارج شوند و شسته شوند.

6.14. اگر مایع باکتریایی روی میز یا زمین ریخته شد، باید بلافاصله محلول اسید کربولیک 5 درصد یا لیزول 3 درصد را حداقل 30 دقیقه قبل از درمان روی محل آلوده بریزید. هنگامی که لباس های کار و کلاه ها به مایع باکتریایی آلوده می شوند، باید بلافاصله آن ها را درآورید و پس از استریلیزاسیون با بخار فشار بالا شست و شو دهید.

6.15. تمام اقلام حاوی باکتری زنده باید قبل از شستشو در زیر شیر آب ضدعفونی شوند. آلودگی فاضلاب اکیدا ممنوع است.

6.16. تعداد کلنی ها در اتاق استریل باید ماهانه بررسی شود. در حالی که نیمکت تمیز باز است، تعدادی پتری ظروف استریل با قطر داخلی 90 میلی متر برداشته و حدود 15 میلی لیتر از محیط کشت نوترینت آگار را که ذوب شده و تا دمای حدود 45 درجه سانتی گراد سرد شده است، به صورت آسپتیک تزریق کنید. پس از انجماد آن را وارونه در دمای 30 تا 35 به مدت 48 ساعت در انکوباتور درجه سانتیگراد قرار دهید. پس از اثبات عقیمی، 3 تا 5 صفحه بردارید و در سمت چپ، وسط و راست محل کار قرار دهید. پس از بازکردن درب و قرار دادن آن ها به مدت 30 دقیقه، آنها را وارونه در انکوباتور 30 ​​تا 35 درجه سانتی گراد به مدت 48 ساعت قرار داده و خارج کنید. بررسی کنید. میانگین تعداد باکتری های متفرقه روی صفحه در یک منطقه تمیز کلاس 100 نباید از 1 کلنی تجاوز کند و میانگین تعداد در اتاق تمیز کلاس 10000 نباید از 3 کلنی تجاوز کند. اگر از حد مجاز فراتر رفت، اتاق استریل باید کاملا ضدعفونی شود تا زمانی که بازرسی های مکرر شرایط را برآورده کند.

7. به فصل (روش بازرسی استریلیت) در «روش های بازرسی بهداشتی دارو» و «روش های عملیاتی استاندارد چین برای بازرسی دارو» مراجعه کنید.

8. بخش توزیع: بخش مدیریت کیفیت

راهنمای فنی اتاق تمیز:

پس از به دست آوردن یک محیط استریل و مواد استریل، ما باید حالت استریل را حفظ کنیم تا بتوانیم یک میکروارگانیسم شناخته شده خاص را مطالعه کنیم یا از عملکرد آنها استفاده کنیم. در غیر این صورت، میکروارگانیسم های مختلف از خارج می توانند به راحتی با هم مخلوط شوند. پدیده اختلاط میکروارگانیسم های نامربوط از خارج را در میکروبیولوژی باکتری های آلوده می نامند. پیشگیری از آلودگی یک تکنیک حیاتی در کار میکروبیولوژیکی است. استریلیزاسیون کامل از یک سو و جلوگیری از آلودگی از سوی دیگر دو جنبه تکنیک آسپتیک هستند. علاوه بر این، ما باید از خروج میکروارگانیسم‌های مورد مطالعه به‌ویژه میکروارگانیسم‌های بیماری‌زا یا میکروارگانیسم‌های دستکاری‌شده ژنتیکی که در طبیعت وجود ندارند، از ظروف آزمایشی خود به محیط خارجی فرار کنیم. برای این منظور، در میکروبیولوژی، اقدامات بسیاری وجود دارد.

اتاق استریل معمولاً یک اتاق کوچک است که مخصوصاً در آزمایشگاه میکروبیولوژی راه اندازی می شود. قابل ساخت با ورق و شیشه مساحت نباید خیلی بزرگ باشد، حدود 4-5 متر مربع و ارتفاع باید حدود 2.5 متر باشد. یک اتاق بافر باید در خارج از اتاق استریل ایجاد شود. درب اتاق بافر و درب اتاق استریل نباید در یک جهت باشند تا جریان هوا از ورود باکتری های متفرقه جلوگیری شود. هم اتاق استریل و هم اتاق بافر باید هوابند باشند. تجهیزات تهویه داخلی باید دارای دستگاه های تصفیه هوا باشند. کف و دیوارهای اتاق استریل باید صاف باشد، کثیفی را در خود جای دهد و به راحتی تمیز شود. سطح کار باید تراز باشد. اتاق استریل و اتاق بافر هر دو مجهز به نور ماوراء بنفش هستند. نور ماوراء بنفش در اتاق استریل 1 متر از سطح کار فاصله دارد. کارکنانی که وارد اتاق استریل می شوند باید از لباس و کلاه استریل استفاده کنند.

در حال حاضر اتاق‌های استریل بیشتر در کارخانه‌های میکروبیولوژی وجود دارد، در حالی که آزمایشگاه‌های عمومی از نیمکت تمیز استفاده می‌کنند. عملکرد اصلی نیمکت تمیز استفاده از دستگاه جریان هوای آرام برای حذف گرد و غبارهای ریز مختلف از جمله میکروارگانیسم های سطح کار است. دستگاه الکتریکی اجازه می دهد تا هوا از فیلتر هپا عبور کرده و سپس وارد سطح کار شود، به طوری که سطح کار همیشه تحت کنترل جریان هوای استریل قرار می گیرد. علاوه بر این، یک پرده هوا با سرعت بالا در سمت نزدیک به بیرون وجود دارد تا از ورود هوای باکتری خارجی جلوگیری کند.

در مکان هایی با شرایط سخت می توان از جعبه های چوبی استریل نیز به جای نیمکت تمیز استفاده کرد. جعبه استریل ساختار ساده ای دارد و به راحتی جابه جا می شود. دو سوراخ در جلوی جعبه وجود دارد که در صورت عدم کارکرد توسط درب های فشاری مسدود می شوند. در حین عمل می توانید دست های خود را دراز کنید. قسمت بالایی جلو مجهز به شیشه برای تسهیل عملکرد داخلی است. یک لامپ ماوراء بنفش در داخل جعبه وجود دارد و ظروف و باکتری ها را می توان از در کوچک کناری داخل آن قرار داد.

تکنیک‌های عملیات آسپتیک در حال حاضر نه تنها نقشی محوری در تحقیقات و کاربردهای میکروبیولوژیکی دارند، بلکه به طور گسترده در بسیاری از بیوتکنولوژی‌ها استفاده می‌شوند. به عنوان مثال، فناوری تراریخته، فناوری آنتی بادی مونوکلونال و غیره.