روشهای استاندارد سازی اتاق استریل و مشخصات پذیرش

1. هدف: این روش با هدف ارائه یک روش استاندارد برای عملیات آسپتیک و محافظت از اتاق های استریل انجام می شود.

2. دامنه کاربرد: آزمایشگاه آزمایش بیولوژیکی

3. فرد مسئول: تستر سرپرست QC

4. تعریف: هیچکدام

5. اقدامات احتیاطی ایمنی

برای جلوگیری از آلودگی میکروبی ، عملیات آسپتیک را انجام می دهد. اپراتورها قبل از ورود به اتاق استریل باید لامپ UV را خاموش کنند.

6. فرآیندهای

6.1. اتاق استریل باید به یک اتاق عمل استریل و یک اتاق بافر مجهز شود. پاکیزگی اتاق عمل استریل باید به کلاس 10000 برسد. دمای داخلی باید در دمای 20-24 درجه سانتیگراد حفظ شود و رطوبت باید در 45-60 ٪ حفظ شود. پاکیزگی نیمکت تمیز باید به کلاس 100 برسد.

6.2. اتاق استریل باید تمیز نگه داشته شود ، و برای جلوگیری از آلودگی ، جمع آوری بقایای آن کاملاً ممنوع است.

6.3. به شدت از آلودگی همه تجهیزات عقیم سازی و رسانه های کشت جلوگیری کنید. آنهایی که آلوده هستند باید استفاده از آنها را متوقف کنند.

6.4. اتاق استریل باید مجهز به ضد عفونی کننده های غلظت کار ، مانند 5 ٪ محلول کرسول ، 70 ٪ الکل ، 0.1 ٪ محلول کلرمیتیونین و غیره باشد.

6.5. اتاق استریل باید به طور مرتب استریل و تمیز شود و با ضد عفونی کننده مناسب تمیز شود تا اطمینان حاصل شود که پاکیزگی اتاق استریل نیازهای خود را برآورده می کند.

6.6. کلیه ابزارها ، ابزارها ، ظروف و سایر مواردی که باید در اتاق استریل آورده شوند باید با روشهای مناسب محکم پیچیده و استریل شوند.

6.7. قبل از ورود به اتاق استریل ، کارکنان باید دست خود را با صابون یا ضد عفونی کننده بشویید و سپس قبل از ورود به اتاق استریل ، به لباس های مخصوص کار ، کفش ، کلاه ، ماسک و دستکش در اتاق بافر (یا دوباره دست خود را با 70 ٪ اتانول پاک کنید) تغییر دهید. عملیات را در محفظه باکتریایی انجام دهید.

6.8. قبل از استفاده از اتاق استریل ، لامپ ماوراء بنفش در اتاق استریل باید بیش از 30 دقیقه برای تابش و عقیم سازی روشن شود و نیمکت تمیز باید همزمان برای دمیدن هوا روشن شود. پس از اتمام عمل ، اتاق استریل باید به موقع تمیز شود و سپس به مدت 20 دقیقه توسط نور ماوراء بنفش استریل شود.

6.9. قبل از بازرسی ، بسته بندی بیرونی نمونه آزمایش باید دست نخورده نگه داشته شود و برای جلوگیری از آلودگی نباید باز شود. قبل از بازرسی ، از 70 ٪ توپ پنبه الکل برای ضد عفونی کردن سطح بیرونی استفاده کنید.

6.10. در طول هر عمل ، برای بررسی قابلیت اطمینان عملکرد آسپتیک باید یک کنترل منفی انجام شود.

6.11. هنگام جذب مایع باکتریایی ، برای جذب آن باید از یک توپ مکش استفاده کنید. نی را مستقیماً با دهان خود لمس نکنید.

6.12. سوزن تلقیح باید قبل و بعد از هر بار استفاده از شعله استریل شود. پس از خنک شدن ، فرهنگ می تواند تلقیح شود.

6.13. نی ها ، لوله های آزمایش ، ظروف پتری و سایر وسایل حاوی مایع باکتریایی باید در یک سطل عقیم سازی حاوی 5 ٪ محلول لیزول برای ضد عفونی خیس شوند و بعد از 24 ساعت بیرون رانده و شستشو داده شوند.

6.14. اگر مایع باکتریایی روی میز یا کف ریخته شده است ، باید بلافاصله 5 ٪ محلول اسید کربولیک یا 3 ٪ لیزول را در ناحیه آلوده حداقل 30 دقیقه قبل از درمان آن بریزید. هنگامی که لباس و کلاه کار با مایع باکتریایی آلوده می شود ، باید بلافاصله از بین بروند و پس از عقیم سازی بخار فشار بالا شسته شوند.

6.15. کلیه موارد حاوی باکتری های زنده باید قبل از شستشو در زیر شیر آب ضد عفونی شوند. آلودگی فاضلاب به شدت ممنوع است.

6.16. تعداد مستعمرات موجود در اتاق استریل باید ماهانه بررسی شود. با باز کردن نیمکت تمیز ، تعدادی از ظروف استریل پتری را با قطر داخلی 90 میلی متر مصرف کنید و به طور جداگانه حدود 15 میلی لیتر محیط کشت آگار مغذی تزریق کنید که در حدود 45 درجه سانتیگراد ذوب شده و خنک شده است. پس از جامد سازی ، آن را وارونه در 30 تا 35 انکوبه به مدت 48 ساعت در یک انکوباتور قرار دهید. پس از اثبات استریل ، 3 تا 5 صفحه را بگیرید و آنها را در سمت چپ ، میانه و راست موقعیت کار قرار دهید. پس از باز کردن پوشش و قرار گرفتن آنها به مدت 30 دقیقه ، آنها را به مدت 48 ساعت در یک انکوباتور 30 ​​تا 35 درجه سانتیگراد قرار دهید و آنها را بیرون بیاورید. بررسی میانگین تعداد باکتری های متفرقه موجود در صفحه در یک منطقه تمیز کلاس 100 نباید از 1 کلنی تجاوز کند و میانگین تعداد آنها در یک اتاق تمیز کلاس 10000 نباید از 3 مستعمره تجاوز کند. در صورت فراتر از حد ، اتاق استریل باید کاملاً ضد عفونی شود تا بازرسی های مکرر الزامات را برآورده کنند.

7. به فصل (روش بازرسی استریل) در "روشهای بازرسی بهداشتی مواد مخدر" و "روشهای عملیاتی استاندارد چین برای بازرسی مواد مخدر" مراجعه کنید.

8. بخش توزیع: بخش مدیریت کیفیت

راهنمایی فنی اتاق تمیز:

پس از به دست آوردن محیط استریل و مواد استریل ، ما باید یک حالت استریل را حفظ کنیم تا یک میکروارگانیسم شناخته شده خاص را مطالعه کنیم یا از عملکرد آنها استفاده کنیم. در غیر این صورت ، میکروارگانیسم های مختلف از خارج می توانند به راحتی مخلوط شوند. پدیده مخلوط کردن میکروارگانیسم های بی ربط از خارج ، باکتری های آلوده کننده در میکروبیولوژی نامیده می شود. جلوگیری از آلودگی یک روش مهم در کار میکروبیولوژیکی است. عقیم سازی کامل از یک سو و جلوگیری از آلودگی از سوی دیگر دو جنبه تکنیک آسپتیک است. علاوه بر این ، ما باید از میکروارگانیسم های مورد مطالعه ، به ویژه میکروارگانیسم های بیماری زا یا میکروارگانیسم های ژنتیکی که در طبیعت وجود ندارند ، جلوگیری کنیم ، از فرار از ظروف آزمایشی ما به محیط خارجی. برای این اهداف ، در میکروبیولوژی ، اقدامات زیادی وجود دارد.

اتاق استریل معمولاً یک اتاق کوچک است که به طور خاص در آزمایشگاه میکروبیولوژی مستقر شده است. می توان با ورق و شیشه ساخته شد. این منطقه نباید خیلی بزرگ باشد ، حدود 4-5 متر مربع و ارتفاع باید حدود 2.5 متر باشد. یک اتاق بافر باید در خارج از اتاق استریل تنظیم شود. درب اتاق بافر و درب اتاق استریل نباید با همان جهت روبرو شود تا از ایجاد جریان هوا باکتری های متفرقه جلوگیری شود. هر دو اتاق استریل و اتاق بافر باید از نظر هوا باشند. تجهیزات تهویه داخلی باید دارای دستگاه های تصفیه هوا باشد. کف و دیوارهای اتاق استریل باید صاف ، حمل و نقل خاک و تمیز کردن آسان باشد. سطح کار باید سطح باشد. هر دو اتاق استریل و اتاق بافر مجهز به چراغ های ماوراء بنفش هستند. چراغ های ماوراء بنفش در اتاق استریل 1 متر از سطح کار فاصله دارد. کارکنان وارد اتاق استریل باید لباس و کلاه استریل بپوشند.

در حال حاضر ، اتاق های استریل بیشتر در کارخانه های میکروبیولوژی وجود دارند ، در حالی که آزمایشگاه های عمومی از نیمکت تمیز استفاده می کنند. عملکرد اصلی نیمکت تمیز استفاده از دستگاه جریان هوای چند لایه برای از بین بردن گرد و غبار های مختلف از جمله میکروارگانیسم های موجود در سطح کار است. دستگاه الکتریکی اجازه می دهد تا هوا از فیلتر HEPA عبور کند و سپس سطح کار را وارد کند ، به طوری که سطح کار همیشه تحت کنترل هوای استریل در جریان نگه داشته می شود. علاوه بر این ، یک پرده هوای پر سرعت در طرف نزدیک به خارج وجود دارد تا از ورود هوای باکتریایی خارجی جلوگیری شود.

در مکان هایی با شرایط دشوار ، از جعبه های استریل چوبی نیز می توان به جای نیمکت تمیز استفاده کرد. جعبه استریل یک ساختار ساده دارد و حرکت آن آسان است. در قسمت جلوی جعبه دو سوراخ وجود دارد که در هنگام کار با درهای فشار فشار مسدود می شوند. می توانید بازوهای خود را در حین کار گسترش دهید. قسمت فوقانی جلو برای تسهیل عملکرد داخلی به شیشه مجهز شده است. یک لامپ ماوراء بنفش در داخل جعبه وجود دارد و ظروف و باکتری ها را می توان از طریق درب کوچک در کنار آن قرار داد.

تکنیک های عملیاتی آسپتیک در حال حاضر نه تنها نقش مهمی در تحقیقات میکروبیولوژیکی و کاربردها دارند بلکه در بسیاری از بیوتکنولوژی ها نیز به طور گسترده مورد استفاده قرار می گیرند. به عنوان مثال ، فناوری تراریخته ، فناوری آنتی بادی مونوکلونال و غیره